睾酮，又称睾固酮、睾丸素、睾丸酮或睾甾酮、睾脂酮等(英语：Testosterone)，是类固醇激素，由男性的睾丸或女性的卵巢分泌，肾上腺亦分泌少量睾酮。睾酮是主要的雌雄激素及蛋白同化甾类。不论是男性或女性，对健康都有重要影响，包括性欲、力量、免疫功能、对抗骨质疏松症等功效。据统计，成年男性分泌睾酮的分量是成年女性的分泌量的约20倍，体内含量是成年女性的7~8倍。
与其他类固醇激素一样，睾酮是由胆固醇所衍生的。男性睾丸可以产生大量睾酮，女性卵巢、胎盘及男性或女性的肾上腺网状带亦会分泌少量的睾酮。
睾酮是经由血液中的性激素结合球蛋白运送至身体的目标组织。男性生殖腺内的塞尔托利氏细胞需要睾酮来生成精子。
睾酮对人类及其他脊椎动物通过两个方式来产生效用：
游离的睾酮会被运送至目标组织细胞的细胞质中，与雄激素受体结合，或被5α还原酶转为血清双氢睾酮（DHT）。DHT同样会与雄激素受体结合（这种结合更稳固，DHT的男性激素强度约是睾酮的2.5倍）。睾酮受体或血清双氢睾酮受体会进行结构性的转变，并让它们进入细胞核，与染色体DNA内特定的核苷酸结合。结合的区域称为激素反应元件（HRE），并影响某些基因的复制活动，产生男性激素效用。
在其他脊索动物的组织内也会有雄激素受体，而雄性及雌性对睾酮的反应也相当一致。在出生前雄性与雌性的睾酮剂量的差异，会导致在青春期或整个生命上的生物差异。
睾酮芳构化成雌二醇会对脑及骨这两个人体重要的组织构成主要的影响。在骨中，雌二醇加速了软骨成长为骨的过程，使骨端接合及完成生长的程序。在中枢神经中，雌二醇是给予下视丘的主要回馈讯号，尤其在影响排卵素的分泌。在很多哺乳动物的脑部中，某些性别差异区域在出生前或产期的雄性化，都是受着睾酮所产生的雌二醇影响，决定将来的雄性性行为。
概括地说，雄激素助长蛋白质的合成及拥有雄激素受体的组织的生长，睾酮的效用可以分为合成代谢及雄性化效应。合成代谢效应包括肌肉质量及力量的增长、增加骨质密度及强度、刺激线性生长及骨骼成熟等。雄性化效应则包括性器官的成熟（尤其是阴茎及胎儿阴囊的生成）、出生后（通常是在青春期）声线的转沉、胡须及体毛的生长等。这些效应一般都是男性的第二性征。
睾酮的影响亦可以自然产生睾酮的时期来区分。在出生后睾酮对男性或女性的不同影响，主要是受着运送游离睾酮的分量及时间所影响。在妊娠后7－12个星期，大部分出生后的男激素效应便会出现，这包括：
此外，睾酮会降低信任感，而催产素则会提高信任感（Bos & others，2010）
现时就睾酮对幼婴的影响所知甚少。在男性幼婴出生后的头一个星期，睾酮的分量开始上升，并维持与青春期相约的分量数个月。在约4－6个月大，睾酮分量会下降至仅能测量的分量。这样的上升未有对身体上其他地方带来改变，其作用仍是未知的，但有学者认为是协助所谓的“脑部男性化”。
在青春期时，睾酮会令孩童出现第一种雄激素上升可见的症状。这些现象包括：
睾酮对成人的影响，对男性比较明显，但对男女两性都同样重要。随着年纪渐长，睾酮的分量下降，这些影响亦随之而减少。这些影响包括：
由于睾酮能提升体能，一些运动员为保持体育状态或表现，会于赛前使用睾酮。男运动员在赛前数小时，可以将睾酮注射阴囊内，激化身体的状态。但现时大部分的体育项目都已把睾酮定为禁药。
过度超量或是长期的使用睾酮，会导致睾丸及男性生殖器萎缩，且导致永久性的阳痿。如果为女性，则会出现乳房萎缩、刺激毛发过度生长、阴蒂肥大貌似小阴茎和长胡子等种种男性化现象。
睾酮首先是在1935年从一头雄牛中抽取，经历多年，已经发展了多种不同的医药种类。现时在北美洲睾酮可以有注射式（如环戊丙酸睾酮及庚酸睾酮）、口服的、口颊的及皮肤渗透式的包、膏与凝胶。
睾酮最初的用途是治疗性腺功能低下症，即补充自体分泌不足或没有自然分泌睾酮的病症。在激素替代疗法（HRT）下适当地使用睾酮，可以维持血液中的睾酮量维持在正常水平。
与其他激素一样，睾酮及其他同化激素除了因缺乏而补充，亦有其他用法，但相对的附带着更大更多的副作用。如不育、性欲丧失（性冷感）或阳痿、骨质疏松症等。1940年代后期，睾酮更被以抗衰老药物为商业噱头，情况与近代的生长激素一样。
利用睾酮的男性化作用，跨性别男性（即由女性经由变性成为男性）会以睾酮作为替代，以维持至一般正常男性的睾酮水平。同样地，跨性别女性会使用药物抑制睾酮的生成，以让雌激素发挥效用。
孕烯醇酮是所有同化激素的前体，亦是胆固醇的衍生物，可以合成睾酮。合成睾酮可以从两个方式进行，即δ-5方式及δ-4方式。δ-5方式是将孕烯醇酮转化脱氢表雄甾酮为雄烯二酮。
δ-4方式是将妊娠素的C-17部分羟基化得出醋酸羟孕酮，再转化为雄烯二酮。雄烯二酮就是睾酮的直接前体。将在C-17部分的酮降为醇就可以得出睾酮。睾酮就是雌二醇的前体。
在过程中加入锌睾酮的合成分量。锌是类固醇受体的运作有着重要影响，且是能使睾酮合成的酶的协助因素。