柔佛海峡（英语：Straits of Johor；马来语：Selat Johor，别称地不佬海峡）是新加坡和马来西亚柔佛州之间水道，东连南中国海，西通马六甲海峡。海峡长52公里，宽1至5公里。有一条1056米长的新柔长堤连接两岸。在二战期间，英军曾炸毁该长堤，防止日军通过海峡，入侵新加坡。

新加坡和马来西亚在1995年8月签订协议，划分柔佛海峡水域的国界。在此之前，两国按照1927年海峡殖民地与柔佛领土水域协议书所划定的一条“假想线”，作为柔佛海峡水域上的国界。

坐标：1°26′48″N 103°45′13″E / 1.44667°N 103.75361°E / 1.44667; 103.75361